无菌室一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。可以用板材和玻璃建造。面积不宜过大，约—平方米即可，高.米左右。无菌室外要设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。 　　..无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到级，室内温度保持在-℃，湿度保持在-%。超净台洁净度应达到级。　　..无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。　　..严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。　　..无菌室应备有工作浓度的消毒液，如％的甲酚溶液，％的酒精，.％的新洁尔灭溶液，等等。　　..无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。　　..需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。　　..工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。　　..无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌分钟。　　..供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用％的酒精棉球消毒外表面。　　..每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。　　..吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。　　..接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。　　..带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，小时后取出冲洗。　　..如有菌液洒在桌上或地上，应立即用%石碳酸溶液或％的来苏尔倾覆在被污染处至少分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。　　..凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。　　..无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约℃的营养琼脂培养基约ml，放至凝固后，倒置于～℃培养箱培养小时，证明无菌后，取平板～个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露分钟后，倒置于～℃培养箱培养小时，取出检查。级洁净区平板杂菌数平均不得超过个菌落，级洁净室平均不得超过个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。